Metòd 1: Metòd Ekstraksyon (Metòd la kounye a anplwaye nan peyi mwen an; li bay pi ba pite men li ofri pi ba pri pwodiksyon.)
Ekstraksyon nan solisyon Oxytocin: Pran 100 g nan poud pitwitè dèyè sèk ak 30 g nan poud kwatz, mete yo nan yon moulen boul, epi ajoute dlo distile. Fè ekstraksyon an kat fwa lè l sèvi avèk menm pwosedi sa a. Volim dlo distile yo ajoute pou chak etap yo se jan sa a: 1.4 L pou de premye ekstraksyon yo, ak 1.3 L pou de ki vin apre yo. Chak ekstraksyon te pote soti pou 45 minit, ki te swiv pa santrifujasyon kolekte likid la; Lè sa a, rezidi ki rete a sibi plis ekstraksyon. Kat ekstrè ki kapab lakòz yo konbine yo bay solisyon an oksitosin. An rezime: Seche Powder Pitwitèr Powder [Dlo, Boul Mill] → Ekstrè Oxytocin → Separasyon Chromatografik.
Pran 1,500 g zeolit sentetik pre-trete, ajoute 20 L yon solisyon 0.25% asid acetic, epi-apre brase-vide melanj lan nan yon kolòn echanj iyon-. Yon fwa nivo solisyon asid acetic la tonbe nan yon pwen 2-3 cm anwo sifas kabann zeolit la, imedyatman prezante ekstrè oksitosin la. Kenbe yon pousantaj koule apwopriye epi kolekte eluate blan ki twoub ki lakòz (fraksyon sa a prensipalman gen oksitosin; paske oksitosin gen yon pwen izoelektrik [pI] 7.7- tandiske vasopressin gen yon pI 10.9-vasopresin fasilman fòme iyon pozitif epi konsa li adsorbe sou kolòn nan). Le pli vit ke nivo likid ekstrè a desann sou sifas kabann zeolit la, imedyatman ajoute dlo distile epi kontinye kolekte eluate twoub la jiskaske koule a sispann. Ajiste pH eluate turbid kolekte a 3.5 lè l sèvi avèk asid acetic glacial. Rapidman chofe solisyon an nan yon beny dlo a 95 degre, kenbe tanperati sa a pou 3 minit, apresa rapidman refwadi solisyon an epi mete l nan frijidè lannwit lan. An rezime: Ekstrè Oxytocin [HAc, Kolòn Zeolit Sentetik] → Eluate Turbid [HAc, Chofaj] → Solisyon Separe → Adsorption & Elution. Nan jou ki vin apre a, filtre solisyon an nan frijidè. Nan filtraj la, ajoute yon sispansyon bentonit 10% pandan y ap brase (ajoute 3 mL sispansyon pou chak 100 mL filtraj). Kontinye brase pou 1 èdtan pou fasilite adsorption, apresa santrifije melanj lan. Teste likid supernatant la lè l sèvi avèk yon solisyon reyaktif asid sulfosalisilik; absans la nan nenpòt presipite endike ke pwosesis la adsorption fini. Si adsorption a enkonplè, repete pwosesis tretman bentonit la; answit, konbine presipitasyon bentonit yo jwenn nan tou de etap adsorption yo. Bentonit la eliye kat fwa lè l sèvi avèk 1% asid acetic (ak volim 1.6 L, 1.4 L, 1.2 L, ak 0.8 L, respektivman). Pou chak eluate, yo ajoute *tèt*-butiltrichloride yon fwa solisyon an chofe a 80 degre; Lè sa a, tanperati a ogmante a 95 degre, rapidman refwadi a 25 degre, epi swa filtre oswa santrifuje. Kat filtraj ki kapab lakòz yo konbine pou detèmine puisans ak limit vasopressin. Koule pwosesis la se jan sa a: Solisyon nan frijidè [Filtrasyon] → Filtre [Bentonite Slurry] → Adsorbate [1% HAc] → Eluate. Preparasyon pou piki Oxytocin:
Solisyon oksitosin teste a, ki satisfè estanda kalite yo, dilye nan yon konsantrasyon 5 U/mL oswa 10 U/mL. Lè sa a, filtre nan yon antonwa vè No. 4 oswa Non{. 5, ranpli nan anpoul, epi esterilize lè l sèvi avèk vapè k ap koule nan 100 degre pou 30 minit pou bay pwodwi final la. Koule pwosesis la se jan sa a: Solisyon Oxytocin (Tès Apwouve) [Filtrasyon, Konble, Sterilizasyon] → Piki Oxytocin.
Rejenerasyon nan zeolit sentetik: Zeolit sentetik la lave de fwa ak dlo distile. Lè sa a, 1.5 L dlo (kalkile ki baze sou 500 g zeolit) ak 150 g klori sodyòm yo ajoute, epi yo melanje melanj lan pou 2 èdtan yo lave lwen epi retire vasopressin. Lè sa a, zeolit la lave ak dlo distile jiskaske pa gen okenn iyon klori rete. Yo ajoute yon kantite dlo apwopriye, epi pH la ajiste a 9 lè l sèvi avèk idroksid sodyòm; se melanj lan brase pou 30 minit, apre sa se supernatant la decante. Zeolit la lave ak dlo distile, pH la ajiste a 5.5-6 lè l sèvi avèk asid silfirik, epi li lave ankò ak dlo jiskaske prèske net. Lè sa a, filtre yo retire depase dlo epi li seche nan 105 degre pou itilize nan lavni. Anvan w itilize, yo ajoute yon kantite dlo ki apwopriye, epi yo ajiste pH la lè l sèvi avèk asid acetic glacial pandan y ap brase pou pèmèt tranpe. Preparasyon 10% sispansyon bentonit: bentonit ak dlo melanje nan yon rapò mas-a-volim 1:10. Se melanj lan mouye pou apeprè 1 èdtan, pandan tan sa a yo ajoute asid acetic pou kenbe yon pH ki estab nan 3.5. Lè sa a, sispansyon ki kapab lakòz yo estoke nan yon frijidè pou itilize nan lavni. Metòd 2: Chimik sentèz. Premyèman, amid heptapeptide (segman 3–9) sentèz apati de benzyloxycarbonyl-leucine *p*-nitrophenyl ester; apre sa, benzyloxycarbonyl-S-benzylcysteine-tirosine azide (segman 1–2) sentèz; ak nan twazyèm etap la, oksitosin se sentèz.